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數字放射自顯影系統的正確操作步驟
更新時(shí)間:2022-08-10
瀏覽:846次
數字放射自顯影系統
主要用于對標記化合物的分布和動(dòng)態(tài)變化進(jìn)行追蹤。放射自顯影也是基因定位的一種重要手段,即所謂的原位雜交技術(shù)。RNA與為其編碼的DNA順序(基因)在分子水平上具有堿基配對的互補關(guān)系,因而可以互相結合,形成DNA-RNA分子雜交體。
如果把帶有放射性標記的RNA與細胞切片相互作用,RNA即可結合到染色體中與其互補的DNA片斷上,把這種切片經(jīng)放射自顯影處理,即顯示出了該RNA基因存在的具體染色體部位,為遺傳學(xué)和基因工程提供有價(jià)值的資料。
數字放射自顯影系統正確操作步驟:
1、使用前先制備放射性同位素標記的化合物,通常是選用發(fā)射低能β射線(xiàn)的同位素,如14C、3H等。
2、使標記化合物被生物組織或細胞吸收,參加生物代謝。
3、把含有標記化合物的組織做成切片,置于載片上,再把切片表面上涂一薄層乳膠,在暗盒中放置一定時(shí)間,進(jìn)行放射性“暴光”,然后按處理照像底片過(guò)程,經(jīng)顯影、定影,顯示出被射線(xiàn)還原的銀粒子。
由于切片中放射性化合物在位置上與銀粒子沉淀吻合,因而銀粒子可指示出放射性化合物存在的部位。有時(shí)還可對切片再進(jìn)行染色處理,以使標記部位顯示明確。
放射自顯影可制做用于光學(xué)顯微鏡觀(guān)察的標本,也可制做供電子顯微鏡觀(guān)察的標本,其分辨力約為0.1μm。放射自顯影標本處理過(guò)程,自涂乳膠步驟開(kāi)始要在嚴密的暗室中進(jìn)行,以免受自然光的干擾,增加本底,降低自顯影效果。
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