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熒光定量PCR儀選擇誤區

更新時(shí)間：2021-08-16瀏覽：866次
 　　Archimed Mini 16熒光定量PCR儀因操作方便、運行速度快、實(shí)驗結果準確，受到越來(lái)越多的分子生物學(xué)研究者青睞。在實(shí)驗技術(shù)成熟的今天，也許對你來(lái)說(shuō)，最難得不是實(shí)驗技術(shù)上的問(wèn)題而是選擇哪一種Archimed Mini 16熒光定量PCR儀，你要征詢(xún)實(shí)驗室成員的意見(jiàn)、分析實(shí)驗室目前乃至將來(lái)的需求、平衡實(shí)驗室的預算，更要詳細研究各種宣傳資料。面對各種不同性能的產(chǎn)品，您又該如何選擇呢？首先建議大家走出認識熒光定量PCR的兩個(gè)誤區：
 
　　誤區一：儀器通道越多越好
 
　　隨著(zhù)PCR技術(shù)的成熟運用，多重擴增越來(lái)越熱鬧，熒光定量PCR儀也不能幸免。從最初ABI公司推出的單通道熒光定量PCR儀發(fā)展到如今各個(gè)廠(chǎng)家都推出4通道、5通道甚至6通道熒光定量PCR儀，眼花繚亂的選擇讓人無(wú)所適從，就有人一不小心走進(jìn)了“通道越多越好”的誤區?？紤]多重熒光定量PCR的通道數的時(shí)候也應該從實(shí)驗室實(shí)際情況出發(fā)，多重PCR并非人人適用、人人可用，因為它使實(shí)驗復雜化了。
 
　　誤區二：Archimed Mini 16熒光定量PCR儀無(wú)需梯度功能
 
　　對于使用染料法的定量PCR反應，雖然有各種各樣的PCR引物設計軟件或者經(jīng)驗公式計算熔解溫度（Tm值），但運用的公式不同、引物序列不同，Tm值的差異會(huì )很大。引物的熔解溫度決定了退火溫度。而且模版中堿基的組合千變萬(wàn)化，對于特殊片斷，經(jīng)驗公式得到的數據不一定能得出準確的結果，退火溫度細微的差異對結果都可能產(chǎn)生決定性的影響，因而“摸條件”一度是讓人很頭疼的問(wèn)題。梯度PCR的出現部分解決了一些問(wèn)題，在反應過(guò)程中每個(gè)孔的溫度控制條件可以在范圍內按照梯度變化，根據結果，一步就可以摸索出適合的反應條件。
 
　　使用有梯度功能的熒光定量PCR可以一次完成以往多次實(shí)驗才能完成的優(yōu)化過(guò)程，簡(jiǎn)化了摸索PCR反應條件的繁瑣實(shí)驗，既節省實(shí)驗時(shí)間提高效率，又節省實(shí)驗成本。

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